陰離子色譜柱是高效液相色譜儀的重要組成部分,其性能的穩(wěn)定性和使用壽命直接影響到分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和實(shí)驗(yàn)效率。為確保其安全運(yùn)行,需遵循以下操作與維護(hù)指南。
安全操作:
安裝前檢查:確認(rèn)色譜柱的耐受pH范圍、溫度范圍和最大壓力,避免超范圍使用。連接色譜柱時(shí),確保管線接口無顆粒雜質(zhì),按色譜柱上標(biāo)識的液流方向安裝,并逐漸增加流量至工作流速。
流動相管理:使用高純試劑和超純水配制流動相,避免使用受到污染的水源。流動相需經(jīng)0.45μm濾膜過濾,并采用在線脫氣或超聲脫氣,防止氣泡進(jìn)入色譜柱。
樣品預(yù)處理:樣品需經(jīng)0.22μm或0.45μm濾膜過濾,去除雜質(zhì)。含有蛋白質(zhì)的樣品,需先沉淀蛋白質(zhì),再經(jīng)固相萃取柱去除蛋白質(zhì)和有機(jī)物。
操作規(guī)范:開泵后保持流量低于0.5mL/min,之后逐漸增加流量至工作流量。避免流動相長時(shí)間停流,防止固定相干縮或樣品擴(kuò)散至柱床深層。
維護(hù)保養(yǎng):
日常清洗:每次使用后,用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑瓷V柱,去除殘留的樣品和雜質(zhì)。清洗時(shí)控制流速和時(shí)間,避免對色譜柱造成損害。
長期保存:長期停用前,用適當(dāng)?shù)娜軇┏錆M色譜柱,防止空氣中的氧氣和水分進(jìn)入。將色譜柱置于干燥、避光的環(huán)境中保存,避免陽光直射和高溫環(huán)境。
定期檢查:在保存期間,定期檢查色譜柱的狀態(tài),如外觀、密封性等。發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)處理,以免影響后續(xù)使用。
再生處理:若色譜柱受到污染,可用組分相同且濃10倍的淋洗液清洗,或使用特定的清洗液(如0.1mol/L草酸清洗金屬離子污染)。